九州空间解析农药残留检测方法

【空白制作】 抽取2.5毫升提取液 +100微升酶+ 100微升显色剂 (30℃温度下培养15分钟),然后将100微升底物摇匀倒入比色皿中即可放入仪器通道中(空白必须通道操作)注:仪器重开机后要重新制作空白值。【样品检测】 1g样品剪碎,用5毫升提取液浸泡10分钟(如果有震荡器、超声波时间可缩短至2分钟左右)……取2.5毫升浸泡液 +100微升酶+ 100微升显色剂(30℃温度下培养15分钟),100微升底物摇匀倒入比色皿中即可放入仪器。当抑制率≥50%时,表示蔬菜中有机磷或氨基甲酸酯类农药超过国家标准,抑制率≥50%的样品需要重复检验2次以上。空白对照测试:步:按下“校准”键。第二步:打开仪器门盖,将装有对照液的比色皿放入指定的通道中,盖好仪器盖,按下“空白”键,仪器进行空白检测倒计时。第三步:空白对照检测结束后,仪器自动显示空白样品对照测试结果Ao,打开仪器盖取出对照。样品测试;步:按下“校准”键。第二步:打开仪器门盖,将装有样品液的比色皿放入指定的通道中,盖好仪器盖,按下“检测”键,仪器进行样品检测倒计时。第三步:检测结束后,仪器自动显示指定通道农药残留检测样品的测试结果Ai,仪器自动保存对照对照值和检测结果,打开仪器盖取出样品。【注】样品的抑制率在40%--50%之间为可疑农残超标样品,若重复数次后抑制率仍大于50%为农残超标样品,表明被测样品的农药残留可能超过安全的界定标准,建议用气象色谱等仪器做进一步的检测。检测结果打印:在显示农药残留检测结果的界面,按“打印”键,仪器开始打印。2.结果判定结果以酶被抑制的程度(抑制率)表示。当蔬菜样品提取液对酶的抑制率≥50%时,表示蔬菜中含有有机磷或氨基甲酸酯类农药存在。抑制率≥50%的样品需要重复检测2次以上。对抑制率≥50%的样品,可用其它方法进一步确定具体农药品种和含量。3.酶抑制法技术指标(1)灵敏度指标酶抑制率法的检测限应达到以下指标:甲胺磷0.8mg/L,敌百虫0.25mg/L,呋喃丹0.002mg/L。(2)符合率在检出的抑制率≥50%的10份以上样品中,经气想色谱法验证,符合率应在80%以上。特别提示:1.仪器重新开机后,必须重新制作空白数值。2.试剂的保存及注意事项本试剂适用的国家标准为:GB/T5009.199-2003。请在冻干状态时用冷冻的方式保存,而溶液状态时用冷藏的方式保存。具体保存期限如下:  
试剂保存期限及方式                          
常温放置 冷冻保存(-20℃以下) 常温放置 冷藏 (4℃)
酶液 12 一年 2~4 710
底物 12 一年 2~4 710
显色剂 避光保存    一年 避光保存    半年
提取液 无期限 无期限
 3.韭菜、生姜、葱、蒜、辣椒、胡罗卜等蔬菜中,含有破坏酶活性的物质,处理这类样品时,不要剪的太碎、浸提时间过长,必要时可采取整株蔬菜浸提。4.农药浓度与抑制率对照表                             (实验条件:37℃)
甲胺磷 浓度(μg/ml) 0.4 0.8 1.6      
抑制率 35.0 52.0 69.0      
氧乐果 浓度(μg/ml) 0.4 0.6 0.8 1.2 1.6 3.75
抑制率 26.4 29.4 36.7 52.7 59.6 76.3
敌百虫 浓度(μg/ml) 0.1 0.15 0.2 0.25 0.4 0.5
抑制率 13.6 22.9 37.2 50.6 63.9 73.9
呋喃丹 浓度(μg/ml) 0.001 0.002 0.003 0.004 0.006 0.008
抑制率 25.2 50.3